CELL-C0378 MC3T3-E1 Subclone 14小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14
- 貨號 ： CELL-C0378
- 規格 ： 1×10⁶cells/T25培養瓶
- 價格 ： 1200元
組織來源 ：顱頂骨
生長狀態 ：貼壁生長
細胞形態 ：成纖維細胞
培養條件 ：
培養基類型 ：MEM（Daucell ，貨號DCM0001）培養基
FBS（Daucell ，貨號DCF8001）: 10%
培養條件 ：37℃ ，CO2: 5%
傳代方法 ：
Ø 收到細胞後 ，在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態 ：
1) 如果沒長滿 ，將培養瓶用75%酒精消毒後放在培養箱靜置數小時（4h左右） ，穩定細胞狀態 ，靜置後鏡檢 ，拍照 ，記錄細胞狀態 。建議傳代後也拍照記錄細胞生長情況 。
2) 如果細胞已經長滿（約80%-90%）則傳代後繼續培養 。
Ø 貼壁細胞傳代方法 ：
1) 棄去培養基 ，用不含鈣 、鎂離子的PBS洗1-2次 ；
2) 加1ml 0.25%的胰酶 ，讓胰酶與大部分細胞接觸 ，隨時觀察細胞狀態變化 ，待細胞大部分變圓後加完全培養基終止消化 。
Ø 懸浮細胞傳代方法 ：可以直接傳代也可以離心法傳代 。
1) 直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉澱在瓶底後 ，將上清吸掉1/2-2/3 ，吹打細胞形成細胞懸液後 ，分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養 ；
2) 離心法傳代是將細胞連同培養液一並轉移到內 ， 1000rpm，5分鍾 ，去除上清 ，加新的培養液到內 ，吹打細胞形成細胞懸液後 ，分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養 。
凍存方法 ：
Ø90%FBS ，10%DMSO ，現用現配。
Ø儲存 ：液氮中長期保存 。
從克隆的但是表型各異的MC3T3-E1細胞係中分離出一係列亞克隆。 從含抗壞血酸培養基生長的成骨細胞中選擇高或低成骨細胞分化 、礦化的亞克隆 。 MC3T3亞克隆4和MC3T3亞克隆14在抗壞血酸和3到4mM無機磷酸鹽中生長表現出高水平的成骨細胞分化 。 它們10天後形成一個礦化良好的細胞外基質（ECM） 。 MC3T3亞克隆24和MC3T3亞克隆30在抗壞血酸中生長表現出很差的成骨細胞分化 。 不形成ECM ， 可以作為亞克隆4和14的陰性對照 。 礦化的亞克隆選擇的表達作為成骨細胞標記的mRNA ，及唾液酸糖蛋白(BSP) ，骨鈣素(OCN) ，和甲狀旁腺激素/甲狀旁腺激素相關蛋白受體的mRNA 。 高或者低的分化潛能的亞克隆在培養中生產出相似數量的膠原質 ，表達可比較的基本水平的mRNA編碼Osf2/Cbfa1 ，一種成骨細胞相關轉錄因子 。 植入免疫缺陷小鼠以後 ，高分化性的亞克隆形成與骨類似的形成小骨的編織骨 ，低分化細胞隻是產生纖維組織 。 這些細胞係是研究體外成骨細胞分化的好模型 ，尤其是ECM信號 。 它們和原代培養顱頂成骨細胞的行為類似 。 在本庫通過支原體檢測 。
Ø 訂購須知 ：
1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時撥打電話或郵箱聯係 ；
注 ：觀察細胞最好在低倍鏡下觀察 ，便於整體估計細胞密度 ；
2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ；
3. 本庫細胞在培養過程不加抗生素 ，請客戶收到細胞後根據需要自行添加雙抗（青黴素和鏈黴素） ；
4. 請用相同條件的培養基用於細胞培養 。培養瓶內多餘的培養基可收集備用 ，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合 ，使細胞逐漸適應培養條件 ；
5. 本實驗室默認T25瓶複蘇的存活細胞常溫發貨 ，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落 ，可離心吹打後重新種入瓶中培養 ；
6. 建議客戶收到細胞後 ，留存一張培養瓶外觀照片以及收到的細胞前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和技術部溝通交流；
7. 細胞培養過程外因太多 ，我們的售後保障期為一周 ，具體處理原則參見售後流程圖（ www.daucell.cn）或谘詢當地銷售人員和經銷商 ，但不提供免費更換服務 。
Ø 注意事項 ：
1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性 ，須在二級生物安全台內操作 ，並請注意防護 ，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌後方能丟棄。
2. 產品使用 ：本產品僅能用於科研 。本產品未通過直接用於活體動物和人的審核 。本產品未通過用於活體診斷的審核 。
MC3T3-E1 Subclone 14小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14說明書CELL-C0378.pdf