CELL-C0149 MCF7 [MCF-7]人乳腺癌細胞

組織來源 ：乳腺 、胸 ；分離自轉移灶 ：胸腔積液

生長狀態 ：貼壁生長

細胞形態 ：上皮細胞

培養條件 ：

培養基類型 ：MEM（Daucell ，貨號DCM0001）培養基

FBS（Daucell ，貨號DCF8001）: 10%

Glutamax: 1%

Non-essential Amino Acids, 100X : 1 %

Sodium Pyruvate 100 mM Solution:1 %

human recombinant insulin: 終濃度0.01 mg/ml

培養條件 ：37℃ ，CO2: 5%

傳代方法 ：

Ø 收到細胞後 ，在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態 ：

1) 如果沒長滿 ，將培養瓶用75%酒精消毒後放在培養箱靜置數小時（4h左右） ，穩定細胞狀態 ，靜置後鏡檢 ，拍照 ，記錄細胞狀態 。建議傳代後也拍照記錄細胞生長情況 。

2) 如果細胞已經長滿（約80%-90%）則傳代後繼續培養 。

Ø 貼壁細胞傳代方法 ：

1) 棄去培養基 ，用不含鈣 、鎂離子的PBS洗1-2次；

2) 加1ml 0.25%的胰酶 ，讓胰酶與大部分細胞接觸 ，隨時觀察細胞狀態變化 ，待細胞大部分變圓後加完全培養基終止消化 。

Ø 懸浮細胞傳代方法 ：可以直接傳代也可以離心法傳代 。

1) 直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉澱在瓶底後 ，將上清吸掉1/2-2/3 ，吹打細胞形成細胞懸液後 ，分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養 ；

2) 離心法傳代是將細胞連同培養液一並轉移到內 ， 1000rpm ，5分鍾 ，去除上清 ，加新的培養液到內 ，吹打細胞形成細胞懸液後 ，分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養 。

凍存方法 ：

Ø90%FBS ，10%DMSO ，現用現配 。

Ø儲存 ：液氮中長期保存 。