CELL-C0172 NR8383大鼠肺泡巨噬細胞
- 貨號 : CELL-C0172
- 規格 : 1×10⁶cells/T25培養瓶
- 價格 :
物種 :大鼠
組織來源 :肺 ;巨噬細胞 ;肺泡
生物安全等級 :BSL-1
生長狀態 :半懸浮或懸浮生長並部分聚團
細胞形態 :巨噬細胞
受體表達情況 :Fc
基因表達情況 :
transforming growth factor beta (TGF beta); interleukin 1 (IL-1); interleukin 6 (IL-6)
培養條件 :
培養基類型 :Ham's F-12K(Daucell,貨號DCM0018)培養基
FBS(Daucell ,貨號DCF8001): 20%
培養條件 :37℃ ,CO2: 5%
傳代方法 :
Ø 收到細胞後 ,在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態 :
1) 如果沒長滿 ,將培養瓶用75%酒精消毒後放在培養箱靜置數小時(4h左右) ,穩定細胞狀態 ,靜置後鏡檢 ,拍照 ,記錄細胞狀態 。建議傳代後也拍照記錄細胞生長情況 。
2) 如果細胞已經長滿(約80%-90%)則傳代後繼續培養 。
Ø 貼壁細胞傳代方法 :
1) 棄去培養基 ,用不含鈣 、鎂離子的PBS洗1-2次 ;
2) 加1ml 0.25%的胰酶 ,讓胰酶與大部分細胞接觸 ,隨時觀察細胞狀態變化 ,待細胞大部分變圓後加完全培養基終止消化 。
Ø 懸浮細胞傳代方法 :可以直接傳代也可以離心法傳代 。
1) 直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉澱在瓶底後 ,將上清吸掉1/2-2/3 ,吹打細胞形成細胞懸液後 ,分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養;
2) 離心法傳代是將細胞連同培養液一並轉移到內 , 1000rpm ,5分鍾 ,去除上清 ,加新的培養液到內 ,吹打細胞形成細胞懸液後 ,分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養 。
凍存方法 :
Ø90%FBS ,10%DMSO ,現用現配 。
Ø儲存 :液氮中長期保存 。
NR8383 (正常大鼠
,1983年8月3日)來源於肺灌洗時的正常大鼠肺泡巨噬細胞
。 細胞在gerbil肺細胞連續培養液存在下培養了大約8-9個月
。 隨後
,不再需要外源生長因子
。
通過有限稀釋法從單個細胞克隆並亞克隆NR8383細胞
,並三次用軟瓊脂亞克隆
。 細胞表現出巨噬細胞的特性
,吞噬酵母多糖和銅綠
,非特異性脂酶活性
,Fc受體
,氧化降解
;分泌IL-1, TNF beta和IL-6
,可重複地響應外源生長因子
。
NR8383細胞響應博萊黴素
,分泌TGF beta前體
。
在博萊黴素刺激下
,TGF beta mRNA表達也上升
。 細胞對內毒素敏感
。
1-10 鈉克/毫升的LPS水平抑製增生達50%
。 即使達到0.001毫克/毫升的水平
,LPS抑製還是無毒且在後續過程中可逆的
。
NR8383細胞株提供了高響應的肺泡巨噬細胞的均一來源
,可以用於體外研究巨響細胞相關活性
。
此細胞半懸浮生長
。
在本庫通過支原體檢測
。
Ø 訂購須知 :
1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ,培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ,若有上述現象發生請及時撥打電話或郵箱聯係 ;
注 :觀察細胞最好在低倍鏡下觀察 ,便於整體估計細胞密度 ;
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息 ,如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ;
3. 本庫細胞在培養過程不加抗生素 ,請客戶收到細胞後根據需要自行添加雙抗(青黴素和鏈黴素);
4. 請用相同條件的培養基用於細胞培養 。培養瓶內多餘的培養基可收集備用 ,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合 ,使細胞逐漸適應培養條件 ;
5. 本實驗室默認T25瓶複蘇的存活細胞常溫發貨 ,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落 ,可離心吹打後重新種入瓶中培養 ;
6. 建議客戶收到細胞後 ,留存一張培養瓶外觀照片以及收到的細胞前3天各拍幾張細胞照片 ,記錄細胞狀態 ,便於和技術部溝通交流 ;
7. 細胞培養過程外因太多 ,我們的售後保障期為一周 ,具體處理原則參見售後流程圖( www.daucell.cn)或谘詢當地銷售人員和經銷商 ,但不提供免費更換服務 。
Ø 注意事項 :
1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性 ,須在二級生物安全台內操作 ,並請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌後方能丟棄 。
2. 產品使用 :本產品僅能用於科研 。本產品未通過直接用於活體動物和人的審核。本產品未通過用於活體診斷的審核 。
NR8383大鼠肺泡巨噬細胞說明書CELL-C0172.pdf