CELL-C0109 HK-2人腎近曲小管細胞
- 貨號 : CELL-C0109
- 規格 : 1×10⁶cells/T25培養瓶
- 價格: 1200元
組織來源 :腎 ,皮質/近曲小管
生長狀態 :貼壁生長
細胞形態 :上皮細胞
培養條件 :
培養基類型:
K-SFM培養基(Gibco ,貨號10785-012) ,100%
培養條件 :37℃ ,CO2: 5%
傳代方法 :
Ø 收到細胞後 ,在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態:
1) 如果沒長滿 ,將培養瓶用75%酒精消毒後放在培養箱靜置數小時(4h左右) ,穩定細胞狀態 ,靜置後鏡檢 ,拍照 ,記錄細胞狀態 。建議傳代後也拍照記錄細胞生長情況 。
2) 如果細胞已經長滿(約80%-90%)則傳代後繼續培養 。
Ø 貼壁細胞傳代方法 :
1) 棄去培養基 ,用不含鈣 、鎂離子的PBS洗1-2次 ;
2) 加1ml 0.25%的胰酶 ,讓胰酶與大部分細胞接觸 ,隨時觀察細胞狀態變化 ,待細胞大部分變圓後加完全培養基終止消化 。
Ø 懸浮細胞傳代方法 :可以直接傳代也可以離心法傳代 。
1) 直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉澱在瓶底後 ,將上清吸掉1/2-2/3 ,吹打細胞形成細胞懸液後 ,分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養 ;
2) 離心法傳代是將細胞連同培養液一並轉移到內 , 1000rpm ,5分鍾 ,去除上清 ,加新的培養液到內 ,吹打細胞形成細胞懸液後 ,分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養 。
凍存方法 :
Ø90%FBS ,10%DMSO ,現用現配 。
Ø儲存 :液氮中長期保存 。
據報道
,人腎近曲小管細胞HK-2含有HPV-16 E6/E7基因的重組逆轉錄病毒載體pLXSN 16 E6/E7
。盡管pLXSN 16 E6/E7對新黴素有抗性
,但不能用G418分離轉導的克隆
。該細胞係基於Southern和FISH分析可分離成單個細胞
。通過PCR測定
,E6/E7基因存在於HK-2基因組中
。細胞保留分化良好的PTCs表型
。堿性磷酸酶
、γ穀氨酰轉肽酶
、亮氨酸氨肽酶
、酸性磷酸酶
、細胞角蛋白
、α3
、β1整聯蛋白和纖連蛋白表達陽性
。VIII因子相關抗原
、6.19抗原和CALLA內肽酶表達為陰性
。HK-2細胞保留著近端腎小管上皮細胞的功能特征
,例如Na+依賴性/根皮苷敏感性糖轉運和腺苷酸環化酶對甲狀旁腺有響應
,但對抗利尿激素不敏感
。該細胞具有生成和儲存糖原的能力來證明
。HK-2細胞貼壁生長
,在甲基纖維素
,軟瓊脂上不生長且不能懸浮生長
。每個批次均通過本庫支原體檢測
,結果為陰性
。經本庫STR檢測無誤
。STR鑒定結果為
:Amelogenin: X,Y; CSF1PO: 13; D13S317: 9; D16S539: 11,12; D5S818: 12; D7S820: 10,11; THO1: 9; TPOX: 8,9; vWA: 17,18
Ø 訂購須知 :
1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ,培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ,若有上述現象發生請及時撥打電話或郵箱聯係 ;
注 :觀察細胞最好在低倍鏡下觀察 ,便於整體估計細胞密度 ;
2. 仔細閱讀細胞說明書 ,了解細胞相關信息 ,如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ;
3. 本庫細胞在培養過程不加抗生素 ,請客戶收到細胞後根據需要自行添加雙抗(青黴素和鏈黴素) ;
4. 請用相同條件的培養基用於細胞培養 。培養瓶內多餘的培養基可收集備用 ,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合 ,使細胞逐漸適應培養條件 ;
5. 本實驗室默認T25瓶複蘇的存活細胞常溫發貨 ,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落,可離心吹打後重新種入瓶中培養;
6. 建議客戶收到細胞後 ,留存一張培養瓶外觀照片以及收到的細胞前3天各拍幾張細胞照片 ,記錄細胞狀態 ,便於和技術部溝通交流 ;
7. 細胞培養過程外因太多 ,我們的售後保障期為一周 ,具體處理原則參見售後流程圖( www.daucell.cn)或谘詢當地銷售人員和經銷商 ,但不提供免費更換服務 。
Ø 注意事項 :
1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性 ,須在二級生物安全台內操作 ,並請注意防護 ,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌後方能丟棄 。
2. 產品使用 :本產品僅能用於科研 。本產品未通過直接用於活體動物和人的審核 。本產品未通過用於活體診斷的審核 。