入門級細胞實驗注意事項 ，總有一個是你要的 ！
1 、什麽培養基中可以省去加酚紅 ？
研究表明 ，酚紅可以模擬固醇類激素的作用（特別是雌激素） 。為避免固醇類反應 ，培養細胞 ，尤其是哺乳類細胞時 ，不用加 。
2 、何時須更換培養基 ？
視細胞生長密度而定 ，或遵照細胞株基本數據上的更換時間 ，按時更換培養基即可 。
3 、可否使用與原先培養條件不同的培養基 ？
不能 。每一細胞株均有其特定使用且已適應的細胞培養基 ，若驟然使用和原先提供的培養條件不同的培養基 ，細胞大都無法立即適應 ，造成細胞無法存活 。
4 、可否使用與原先培養條件不同的血清種類 ？
不能 。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源 ，所以血清的種類和品質對於細胞的生長會產生極大的影響 。來自不同物種的血清 ，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同 ，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活 。
5 、懸浮性細胞應如何傳代處理 ？
一般僅需持續加入新鮮培養基於原培養角瓶中 ，稀釋細胞濃度即可 ，若培養液太多時 ，可將培養角瓶口端稍微抬高 ，直到無法容納為止 。分瓶時取出一部份含細胞的培養液至另一新的培養角瓶 ，加入新鮮培養基稀釋至適當濃度 ，重複前述步驟即可 。
6 、冷凍管應如何解凍 ？
取出冷凍管後 ，須立即放入37℃水槽中快速解凍 ，輕搖冷凍管使其盡快全部融化 ，並注意水麵不可超過冷凍管蓋沿 ，否則易發生汙染情形 。另外 ，冷凍管由液氮桶中取出解凍時 ，必須注意安全 ，預防冷凍管之爆裂 。
7 、細胞冷凍管解凍培養時 ，是否應馬上去除DMSO ？
除少數特別注明對DMSO 敏感的細胞外 ，絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞) ，在解凍之後 ，應直接放入含有10-15 mL新鮮培養基的培養角瓶中 ，待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO 即可 ，如此可避免大部分解凍後細胞無法生長或貼附的問題 。
8 、欲將一般動物細胞離心下來 ，其離心速率應為多少轉速 ？
回收動物細胞 ，其離心速率一般為300×g（約1000 rpm） ，5-10 分鍾，過高的轉速 ，將造成細胞死亡 。
9 、細胞冷凍培養基的成份為何 ？
動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養基是含5-10% DMSO（dimethyl sulfoxide）和90-95% 原來細胞生長用的新鮮培養基均勻混合之。注意 ：由於DMSO 稀釋時會放出大量熱能 ，故不可將DMSO直接加入細胞液中 ，必須使用前先行配製完成 。
10 、冷凍保存細胞的方法？
冷凍保存方法一 ：冷凍管置於4℃ ，30-60分鍾→置於-20℃ ，30分鍾→置於-80℃ ，16-18小時（或隔夜）→液氮槽vaporphase長期儲存 。
冷凍保存方法二 ：冷凍管置於已設定程序的可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃至-80℃以下 ，再放入液氮槽vapor phase長期儲存 。-20℃不可超過1 小時 ，以防止冰晶過大 ，造成細胞大量死亡 ，亦可跳過此步驟 ，接放入-80℃冰箱中 ，惟存活率稍微 降低一些 。
11、細胞欲冷凍保存時 ， 細胞冷凍管內應有多少細胞濃度 ？
冷凍管內細胞數目一般為1×106 cells/mL vial ，融合瘤細胞則以5×106 cells/mL vial 為宜 。
12 、培養基中是否須添加抗生素 ？
除於特殊篩選係統中外 ，一般正常培養狀態下 ，培養基中不應添加任何抗生素 。
13 、CO2培養箱的水盤如何保持清潔 ？
定期（至少每兩周1次）以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之 。
14 、 為何培養基保存於4℃冰箱中 ，顏色會偏暗紅色 ，且pH值會越來越偏堿性 ？
培養基保存於4℃冰箱中 ，培養基內的CO2會逐漸溢出 ，造成培養基越來越偏堿性 。而培養基中的酸堿指示劑（通常為phenol red）的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅 。
培養基偏堿的結果 ，將造成細胞生長停滯或死亡 。若培養基偏堿時 ，可以通入無菌過濾的CO2 ，以調整pH 值 。
15、各種細胞培養用的dish ，flask是否均相同 ？
不同廠牌的dish 或flask ，其所coating的polymer不同，製造程序亦不同 ，雖對大部分細胞沒有太大之影響 ，惟少數細胞則可能因使用廠牌不同的dish 或flask 而有顯著的生長差異 。
16 、購買的細胞冷凍管經解凍後 ，為何會發生細胞數目太少的情形 ？
研究人員在冷凍細胞的培養時出現細胞數目太少 ，大都是因為離心過程操作上的失誤 ，造成細胞的物理性損傷 ，以及細胞流失 。建議細胞解凍後不要立刻離心 ，應待細胞生長隔夜後再更換培養基即可 。
17 、購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因 ？
研究人員在細胞培養時出現存活率不佳 ，常見原因可歸納為 ：培養基使用錯誤或培養基品質不佳 。血清使用錯誤或血清的品質不佳 。解凍過程錯誤 。冷凍細胞解凍後 ，加以洗滌細胞和離心 。懸浮細胞誤認為死細胞 。培養溫度使用錯誤 。細胞置於-80℃太久 。
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