新細胞汙染鑒定

2021-06-12 13:00:34 藍冠娛樂生物 727

如何鑒定收到的新細胞是否有汙染 :

一 、肉眼觀察以下幾項 :
1. 細胞瓶身 :
如果瓶身上沒有裂縫 ,正常 ;如果瓶身上有裂縫 ,則汙染幾率非常大 。
2. 培養基顏色 :
如果培養基顏色是紅色或者粉色 ,正常 ;如果是橙色 ,則可能是汙染或者細胞過密 ;如果是黃色 ,則汙染幾率非常大 。
3. 培養基澄清度 :
如果培養基澄清 ,正常;如果有少許漂浮物 ,則可能是汙染或者有細胞凋亡 ;如果培養基很渾濁 ,甚至出現絮狀物 ,則汙染幾率非常大 。

二 、進行顯微鏡下觀察(通常觀察前需先靜置細胞1-2h)
顯微鏡下可以清晰觀察到細胞是否有菌類汙染 ,菌類汙染通常分為杆菌 、球菌和黴菌 ,為了方便大家分辨,我特地找了之前收到有典型汙染的細胞照片 ,希望能幫助大家判斷 。
1. 杆菌

藍冠娛樂

常見的有大腸杆菌 ,長度通常在2-5um左右 。

2. 球菌

藍冠娛樂

常見的有葡萄球菌 ,直徑通常在1-2um左右 。

3. 黴菌

藍冠娛樂


常見的有毛黴 ,菌絲寬2-10um左右 ,長度短則幾十um ,長則可達幾mm 。

      需要提醒的是 ,因為運輸過程中細胞離開了其正常生長所需要的環境 ,部分細胞會出現凋亡或產生細胞碎片 ,容易誤認為是細菌汙染 ;另外培養基中的雜質纖維也容易誤認為是黴菌汙染 ,具體區分方法如下 :

1.細胞碎片和杆菌
細胞碎片隻會隨著細胞狀態的變差而變多 ,通常增長不快 ;杆菌則增殖非常快 ,以常見的大腸杆菌為例 ,常溫25℃增殖1倍需要40min左右(此數據可查閱相關文獻驗證) ,培養基很快變黃且渾濁 。

2.凋亡細胞和球菌

凋亡細胞通常隻比正常細胞小一點 ,隻會隨著細胞狀態的變差而變多 ,通常增長不快 ;球菌則要小很多 ,且成串或成團 ,培養基很快變黃且渾濁 。

3.雜質纖維和黴菌
雜質纖維通常是過濾時殘留的濾紙纖維 ,或者是酒精棉球上的棉纖維 ,在不開瓶處理的情況下其數量不會增長 ;黴菌的話雖然增殖速度沒有杆菌和球菌快 ,但還是會有明顯增殖 。