• 細胞劃痕實驗

    細胞劃痕實驗是檢測細胞運動中一種成本極低又簡單易行的體外試驗方法 。原理 :當細胞長到融合成單層狀態時 ,在融合的單層細胞上人為製造一個空白區域 ,稱為“劃痕” 。劃痕邊緣的細胞會逐漸進入空白區域使“劃痕”愈合 。在細胞遷移過程中在開始和定期捕獲圖像 ,通過比較圖像以確定細胞遷移速率 。實驗步驟 :1.劃線 :先用marker筆在6孔板背後 ,用直尺比著 ,均勻的劃橫線 ,大約每隔0.5~1cm一道 ,橫穿過孔 。每孔至少穿過

    2021-08-11 藍冠娛樂生物 516

  • 如何做好細胞克隆形成

    (一)實驗目的通過細胞在細胞培養板上的克隆形成能力來提示細胞的增殖能力 。(二)實驗原理克隆形成是測定細胞增殖能力的有效方法之一 。單個細胞在體外持續6代以上 ,其後代所組成的細胞群稱為克隆 。這時每個克隆含有50個以上的細胞 ,大小在0.3-1.0 mm之間 ,通過計數克隆形成率 ,可對單個細胞的增殖潛力做定量分析 ,了解細胞的增殖能力和獨立生存能力 。(三)實驗流程(四) 實驗材料生物安全櫃 、熒光顯微鏡 、離心機

    2021-08-10 藍冠娛樂生物 588

  • 細胞技術COIP操作及注意事項

    一 、原理 : 免疫共沉澱(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用於研究蛋白質相互作用的經典方法 。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法 。其原理是 :當細胞在非變性條件下被裂解時 ,完整細胞內存在的許多蛋白質-蛋白質間的相互作用被保留了下來 。如果用蛋白質 X 的抗體免疫沉澱 X ,那麽與 X 在體內結合的蛋白質 Y 也能沉澱下來 。目前

    2021-08-09 藍冠娛樂生物 574

  • 流式細胞術常見問題問答

    1、流式細胞儀上的FL2-W FL2-A FL2-H 分別是做什麽的 ? FL2-W是隻檢測熒光的脈衝寬度, FL2-H是指脈衝高度 。通常在做細胞周期分析時應用 ,用於去除粘連細胞 。2 、流式同型對照怎樣選擇 ? 同型對照(IsotypeControl) :使用與一抗相同種屬來源 、相同亞型 、相同劑量和相同的免疫球蛋白及亞型的免疫球蛋白 ,用於消除由於抗體非特異性結合到細胞表麵而產生的背

    2021-08-09 藍冠娛樂生物 1246

  • 細胞培養基的基本要求(細胞培養基,培養基,滲透壓,激素)

    體外培養的細胞直接生活在培養基中 ,因此培養基應能滿足細胞對營養成分 、促生長因子 、激素 、滲透壓 、pH等諸多方麵的要求 。一 、營養成分 維持細胞生長的營養條件一般包括以下幾個方麵 : 1.氨基酸 : 是細胞合成蛋白質的原料 。所有細胞都需要12種必須氨基酸 :纈氨酸 、亮 、異亮、蘇 、賴 、色、苯丙 、蛋 、組 、酪 、精氨酸 、胱氨酸 。此外還需要穀氨酰胺 ,它在細胞代謝過程中有重要作用 ,所

    2021-08-08 藍冠娛樂生物 157

  • 細胞培養基礎篇-複蘇

    細胞培養看似簡單 ,但實則有很多細節需要注意 ,今天就從最基礎的細胞複蘇說起 ,當然內容主要還是針對新入門的“學徒” ,如有不足之處 ,也請廣大站友不吝賜教 。操作步驟 :1.從液氮罐中取出凍存管 ,放入37度水浴鍋中融化 ,800-1000rpm離心3-5min ;2.慢慢吸去上清 ,加入適量完全培養基重懸細胞團 ,轉移至培養皿或細胞瓶 ;3.補足完全培養基 ,放37度培養箱中培養 。注意細節 :1.從液氮罐中拿出凍存管時要做

    2021-08-07 藍冠娛樂生物 372

  • 細胞培養基礎篇-傳代

    傳代是貼壁細胞培養過程中不可或缺的一步 ,也是最容易出問題的一步 ,今天就來說下細胞傳代的操作步驟和注意細節 。操作步驟 :1.用移液器吸走原培養基 ,加入適量PBS洗1-2遍 ;2.加入適量胰酶 ,置於培養箱中消化 ;3.待消化到位後加入適量血清或完全培養基終止消化 ,800-1000rpm離心3-5min ;4.去上清 ,加入適量完全培養基重懸後轉移到培養皿 ,放37度培養箱 。注意細節 :1.吸走原培養基時盡量吸盡 ,用

    2021-08-06 藍冠娛樂生物 264

  • 【主題學習】細胞實驗總結

    MTT原理 :MTT是一種檢測細胞功能的方法 。細胞在活化增殖的過程中 ,線粒體的能量代謝能夠把MTT代謝為藍紫色的甲臢 ,甲臢沉積於細胞內或細胞周圍 ,形成甲臢的量與細胞活化的程度成正比,通過鹽酸異丙醇或其他溶劑溶解甲臢 ,用酶標儀測溶液的光密度就可以反映甲臢的量並從而判斷細胞活化增殖的程度 。步驟 :1 、培養好細胞種板 。 養細胞沒啥好說的 ,如果不知道細胞如何養 ,那就看看相關的文獻方法 。如果知道了細

    2021-08-05 藍冠娛樂生物 408